
1. 明場
測量前,充分混勻細胞懸液(用1mL移液器反復吸打混勻10次),取出20μL勻速注入到對應的通道內(nèi)。稍待片刻,點擊“計數(shù)”,設備自動進入聚焦曝光,數(shù)秒后顯示實時圖像,旋即彈出計數(shù)結(jié)果界面。
稀釋方法:通過輸入目標濃度和目標體積,自動計算稀釋方法。
優(yōu)化設置:對細胞進行直徑大小,閾值[1]的設門,在新參數(shù)下再次計算。
直方圖:細胞直徑分布圖,結(jié)團分布圖。
顯示結(jié)果圖、查看原圖:原圖和結(jié)果圖查看切換。
2.臺盼蘭
測量前,充分混勻細胞懸液(用1mL移液器反復吸打混勻10次),取出10μL細胞懸液和臺盼蘭染液(10μL)1:1混勻,取出20μL勻速注入到對應的通道內(nèi)。在該界面右上角選擇“算法曝光”,點擊“計數(shù)”,設備自動進入算法曝光和自動聚焦,數(shù)秒后顯示實時圖像,旋即彈出計數(shù)結(jié)果界面?!岸ㄖ灯毓狻毖永m(xù)了上一次算法曝光的曝光值,直至再次進行“算法曝光”。當更換臺盼蘭染料時,首次測量請調(diào)整至“算法曝光”進行。
3.AOPI
測量前,充分混勻細胞懸液(用1mL移液器反復吸打混勻10次),取出10μL細胞懸液和AOPI染液(10μL)1:1混勻,取出20μL勻速注入到對應的通道內(nèi)。點擊AOPI,根據(jù)下面的規(guī)則選擇子app:
① 規(guī)則細胞和不規(guī)則細胞app:測正常大小的哺乳動物細胞;
② pbmc app:測傳代的小細胞(背景干凈,非原代或組織裂解,或是血液提取的小細胞。如pbmc, T細胞均是分離純化的細胞類型,無雜質(zhì),無碎片)。
③ 血液app:單細胞測序多用這個app,適合原代,組織裂解,血液提取的細胞,如原代分離的pbmc,有雜質(zhì),富含碎片的樣本。
針對樣本對aopi不同的著色效果,右上角設置了三檔曝光時間支持切換,在樣本著色較淺的時候可以選擇“高”曝光來補償。
[1] Halo Counter 采用的神經(jīng)網(wǎng)絡AI算法,“閾值”設定的越小,原則上識別的細胞越多。
[2] Halo Counter 計數(shù)板具備調(diào)節(jié)高度功能,請在測樣品前確認高度是否被人為修改。